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總大腸菌群及大腸埃希氏菌酶底物法

時間:2020-02-10   來源:青島海晶環(huán)保  作者:海晶環(huán)保——孟
1、 檢測步驟
用 100 mL的無菌稀釋瓶量取 100 mL 待檢測水樣，加入一管酶底物法培養(yǎng)基粉末，混搖均勻使之完全溶解。準備 10 支10ml適當大小的滅菌試管，用無菌吸管分別將上述稀釋瓶中吸取10mL水樣至各試管中，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。
2、 結(jié)果觀察與報告
大腸菌群：將培養(yǎng) 24 h之后的試管取出觀察，如果試管內(nèi)水樣變成黃色則表示該試管含有總大腸菌群。計算有黃色反應的試管數(shù)，對照下表2查出其代表的總大腸菌群最可能數(shù)CMPN）。 結(jié)果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未產(chǎn)生黃色，則可報告為總大腸菌群未檢出。
表2   不同陽性結(jié)果的最可能數(shù)（MPN）及 95%可信范圍
陽性試管數(shù) 總大腸菌群(MPN/100ml) 95%可信范圍
下限 上限
0 ＜1.1 0 3.0
1 1.1 0.03 5.9
2 2.2 0.26 8.1
3 3.6 0.69 10.6
4 5.1 1.3 13.4
5 6.9 2.1 16.8
6 9.2 3.1 21.1
7 12 4.3 27.1
8 16.1 5.9 26.8
9 23 8.1 59.5
10 ＞23.0 13.5 　
大腸埃希氏菌：將培養(yǎng)24h顏色變成黃色的水樣的試管，在暗處用紫外燈觀察，如果有藍色熒光產(chǎn)生則表示有大腸埃希氏菌。計算有熒光反應的試管數(shù)，對照表1 查出其代表的大腸埃希氏菌最可能數(shù)MPN）， 結(jié)果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未產(chǎn)生藍色熒光，則可報告為大腸埃希氏菌未檢出。

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